Застосування аналіт-опосередкованої фермент-активуючої системи ампліфікації сигналу імуноферментного аналізу для визначення низьких концентрацій біоаналітів

Автор(и)

  • О. Ю. Галкін Національний технічний університет України «Київський політехнічний інститут»
  • Ю. В. Горшунов Науково-дослідний та конструкторсько-технологічний інститут міського господарства

DOI:

https://doi.org/10.18372/2306-6407.1.8251

Ключові слова:

імуноферментний аналіз, тирамін-біотіновий реагент, авідин-біотінове посилення сигналу, IgE людини

Анотація

В роботі представлені результати розробки і характеристики імуноферментного аналізу (ІФА) для визначення загальних IgE-антитіл із застосуванням тирамін-біотінового реагенту (ТБР). Було показано, що використання модифікацій ІФА з авидин-біотіновим посиленням сигналу (АБУ) і ТБР істотно розширюють можливості застосування аналізу в дозах IgE людини нижче 50 МО/мл. З метою діагностики найбільш прийнятним виявився ІФА з АБУ, разом з тим, у випадках, коли виникає потреба у визначенні надмалих концентрацій аналіту (сотні пікаграмм), єдиним можливим варіантом залишається ІФА з ТБР. За використаної концентрації реагентів ІФА динамічний діапазон для всіх модифікацій склав три порядки.

Біографії авторів

О. Ю. Галкін, Національний технічний університет України «Київський політехнічний інститут»

доцент кафедри промислової біотехнології, к.біол.н., доцент

Ю. В. Горшунов, Науково-дослідний та конструкторсько-технологічний інститут міського господарства

старший науковий співробітник відділу міської інфраструктури, к.т.н.

Посилання

Catalyzed reporter deposition, a novel method of signal amplification. Application to immunoassays / [Bobrow M. N., Harris T. D., Shaughnessy K. J., Litt G. J.] // J. Immunol. Meth. – 1989. – Vol. 125(1-2). – P. 279-285.

The use of catalyzed reporter deposition as a means of signal amplification in a variety of formats / [Bobrow M. N., Litt G. J., Shaughnessy K. J. et al.] // J. Immunol. Meth. – 1992. – Vol. 150(1-2). – P. 145-149.

Van Gijlswijk R. Fluorochrome-labeled tyramides: use in immunocytochemistry and fluorescence in situ hybridization / Van Gijlswijk R., Zijlmans H., Wiegant J. // J. Histochem. Cytochem. – 1997. – Vol. 45(3). – P. 375.

Tijssen P. Practice and theory of enzyme immunoassays / P. Tijssen // Lab. Techiques in Biochem. and Molecular Biology. – 1985. – 15. – 674 p.

Goding J. Monoclonal antibodies. Principles and practice / J. Goding. – San Diego: Academic press, 1996. – 492 p.

Простые иммунохимические методы определения пестицидов на основе биотин-стрептавидиновой системы / [Павлова И. С., Любавина И. А., Жердев А. В., Зинченко А. А.] // Биоорг. химия. – 1997. – Т. 23, № 10. – С. 832-383.

Galkin A.Yu. Elaboration of immunoenzymatic test-kit for total human IgE assay and investigation of its analytical properties / A. Yu. Galkin, A. M. Dugan // Int. J. Immunol. – 2013. – Vol. 1(1). – Р. 1-6.

Розробка і порівняльна характеристика різних модифікацій імуноферментного аналізу для визначення специфічних IgE-антитіл / [Галкін О. Ю., Михальчук М. В., Казмірчук В. Є., Гурженко Ю. М.] // Вісник Київського національного університеті імені Тараса Шевченка. Серія: Біологія. – 2014. – №1(66). – С.15-21.

Отримання та вивчення властивостей нових моноклональних антитіл до IgE людини / [Галкін О. Ю., Савченко А. А., Нікітіна К. І., Дуган О. М.] // Укр. біохім. жур. – 2013. – Т. 85, № 8. – С. 81-87.

Опубліковано

2015-06-01

Номер

Розділ

Експериментальні роботи